Sentinel® Plus 口蹄疫病毒非結構蛋白酵素免疫試劑
口蹄疫(foot and mouth disease, FMD)為偶蹄類動物之高度傳染性病毒疾病之一,主要感染的經濟動物如牛、羊、豬等,其特徵為在口、鼻、舌、趾、蹄冠、乳房及乳頭部皮膚產生水泡後糜爛。口蹄疫病毒是屬於Picornaviridae的一種,含有七種不同的血清型,分別為:A、O、C、亞洲一型(Asia I)、南非一型(SAT I)、南非二型(SAT II)及南非三型(SAT III)。每一血清型中又有多個亞型。當動物被其中一種血清型感染時,對其他六種血清型的病毒株皆仍具有感受性。
當動物受口蹄疫病毒感染後,病毒在被感染之動物體內會快速的複製,且快速的出現症狀,潛伏期一般約1~7天,最短12小時,最長約14天即可觀察到症狀。因口蹄疫病毒擁有快速複製、傳染及產生症狀等特徵,往往造成農民嚴重的損失。基於前述,開發本快速檢驗試劑套組,可提供給農民經濟上的風險規避方案,也可以在動物群中快速篩檢出被感染的個體,以阻斷擴大傳染的可能性。
本試劑為一鍵結有單株抗體及口蹄疫病毒非結構蛋白(Non-structural Protein, NSP)之3ABC重組蛋白的酵素免疫分析盤,加入稀釋5倍的血清/血漿後進行反應,若檢體中含有口蹄疫病毒NSP之抗體,則會與3ABC重組蛋白結合,再加入辣根過氧化物酶標示之抗3ABC特異性單株抗體,與未結合NSP抗體之重組蛋白形成抗原抗體複合物。最後以TMB反應呈色,並以酵素免疫分析儀讀取波長450 nm之數值,透過計算抑制百分比(percentage inhibition, PI ),便可得知檢體是否含有口蹄疫病毒非結構蛋白抗體。
☆確效實驗一:應用於不同物種之效能分析
由家畜衛生試驗提供台灣地區田間檢體並進行下列實驗:
1. 豬血清檢體
●30 例O型口蹄疫攻毒陽性血清
●50例陰性血清
●靈敏度:96.7% (29/30)
●專一性:100% (50/50)
2. 山羊血清檢體
●30例陽性血清
●50例陰性血清
●靈敏度:100% (30/30)
●專一性:100% (50/50)
※結論:Sentinel® Plus 口蹄疫非結構蛋白酵素免疫試劑對於偵測O型蹄疫病毒株具有高度專一性及靈敏度。
☆確效實驗二:與市售FMDV NSP Ab ELISA產品(PrioCHECK®)檢測結果一致性
※結論:Sentinel® Plus 口蹄疫非結構蛋白酵素免疫試劑與市售公認的ELISA試劑之測試結果具有高度一致性。
操作步驟:
數據判讀:
1. |
Chen TH, Pan CH, Jong MH, Lin HM, Huang YL, Hsiung KP, Chao PH, Lee F. Development of a chromatographic strip assay for detection of porcine antibodies to 3ABC non-structural protein of foot-and-mouth disease virus serotype O.J Vet Med Sci. 2009 Jun;71(6):703-8. |
2. |
OIE, 2.1.5 FMD, Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, 2008; 6th ed.. |