Sentinel®Plus 口蹄疫病毒非结构蛋白酵素免疫试剂
口蹄疫(foot and mouth disease, FMD)为偶蹄类动物之高度传染性病毒疾病之一,主要感染的经济动物如牛、羊、猪等,其特征为在口、鼻、舌、趾、蹄冠、乳房及乳头部皮肤产生水泡后糜烂。口蹄疫病毒是属于Picornaviridae的一种,含有七种不同的血清型,分别为:A、O、C、亚洲一型(Asia I)、南非一型(SAT I)、南非二型(SAT II)及南非三型(SAT III)。每一血清型中又有多个亚型。当动物被其中一种血清型感染时,对其他六种血清型的病毒株皆仍具有感受性。
当动物受口蹄疫病毒感染后,病毒在被感染之动物体内会快速的复制,且快速的出现症状,潜伏期一般约1~7天,最短12小时,最长约14天即可观察到症状。因口蹄疫病毒拥有快速复制、传染及产生症状等特征,往往造成农民严重的损失。基于前述,开发本快速检验试剂套组,可提供给农民经济上的风险规避方案,也可以在动物群中快速筛检出被感染的个体,以阻断扩大传染的可能性。
☆确效实验一:应用于不同物种之效能分析
由家畜卫生试验提供台湾地区田间检体并进行下列实验:
1. 猪血清检体
●30 例O型口蹄疫攻毒阳性血清
●50例阴性血清
●灵敏度:96.7% (29/30)
●专一性:100% (50/50)
2. 山羊血清检体
●30例阳性血清
●50例阴性血清
●灵敏度:100% (30/30)
●专一性:100% (50/50)
※结论:Sentinel®口蹄疫非结构蛋白酵素免疫试剂对于侦测O型蹄疫病毒株具有高度专一性及灵敏度。
☆确效实验二:与市售FMDV NSP Ab ELISA产品(PrioCHECK®)检测结果一致性
※结论:Sentinel®口蹄疫非结构蛋白酵素免疫试剂与市售公认的ELISA试剂之测试结果具有高度一致性。
操作步骤:
数据判读:
1. |
Chen TH, Pan CH, Jong MH, Lin HM, Huang YL, Hsiung KP, Chao PH, Lee F. Development of a chromatographic strip assay for detection of porcine antibodies to 3ABC non-structural protein of foot-and-mouth disease virus serotype O.J Vet Med Sci. 2009 Jun;71(6):703-8. |
2. |
OIE, 2.1.5 FMD, Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, 2008; 6th ed.. |
本试剂为一键结有单株抗体及口蹄疫病毒非结构蛋白(Non-structural Protein, NSP)之3ABC重组蛋白的酵素免疫分析盘,加入稀释5倍的血清/血浆后进行反应,若检体中含有口蹄疫病毒NSP之抗体,则会与3ABC重组蛋白结合,再加入辣根过氧化物酶标示之抗3ABC特异性单株抗体,与未结合NSP抗体之重组蛋白形成抗原抗体复合物。最后以TMB反应呈色,并以酵素免疫分析仪读取波长450 nm之数值,透过计算抑制百分比(percentage inhibition, PI ),便可得知检体是否含有口蹄疫病毒非结构蛋白抗体。