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犬類62項急性過敏原篩檢服務(D62)
犬隻就如同人類一般,會因為食用過敏性食物或接觸到過敏性化學物質而造成皮膚紅腫、掉毛、腸胃炎等過敏症狀。過敏原檢測,可以幫助獸醫師正確診斷過敏病因,以利治療。傳統之過敏檢測是採用皮膚測試法
(skin test),以皮內注射方式將過敏原注入皮下,雖然準確度高,但是操作麻煩,且對於過敏症狀嚴重的寵物,有相當大的風險(過敏性休克)。凌越生醫運用最新之生物晶片技術,開發出犬類62項過敏原生物晶片檢測,只須少量狗隻血液(0.2
c.c),即可快速檢測出是否具有與過敏原對應的特異性抗體(免疫球蛋白E)。不但安全、快速,更可同時偵測出多種可能的過敏因子。
過敏反應
過敏是一種免疫的過度作用,當寵物吸入或接觸到過敏原時,會產生的免疫反應,依據來源可分為:
接觸性:由皮膚接觸所引起,症狀以身體紅腫搔癢為多。例如:清潔劑、蟲體、植物…等。
吸入性:經由呼吸道進體內,出現鼻癢、呼吸急促、流鼻水等。例如:蟑螂、樹木、粉塵、花粉、塵蟎、黴菌、動物毛皮(狗毛、貓毛)
…等。
食入性:經由消化道進入體內的各種食物,造成腸胃道不適,如嘔吐、下痢。例如:食品化學添加物、牛奶、蛋白、藥物…等。
注射性:藥物注射或蚊蟲叮咬引起的過敏症狀。
生物晶片簡介
生物晶片為新開發之生物技術,目前多應用於醫學、生物學、免疫學、製藥學等相關領域。生物晶片的製作乃採用精密的顯微技術,運用機械手臂在指尖般大小的晶片上,點印數萬個生物分子探針(例如核酸或蛋白質),用來進行各種高效率的測試和分析。
生物晶片常以矽晶片、玻璃或高分子材質製成,具有體積小、反應快速,而且具有能同時分析大量生物資訊之特點。生物晶片又可區分為基因晶片(DNA
chip)和蛋白質晶片(protein chip)兩大類。基因晶片可用來分析各種基因的變化與相互關連;而蛋白質晶片則多用來分析蛋白質的結合反應(抗原、抗體或其他的生物分子)。目前已有許多生物晶片應用於醫療檢驗上。此外,微陣列生物晶片也是科學研究與新藥開發的利器。
應用蛋白質晶片於過敏檢測
本產品針對台灣地區過敏原之區域性特色,研發出犬類62項過敏原生物晶片,用來篩檢過敏原。運用蛋白質純化與晶片製造技術,在玻璃載體上,點印數百個不同種類的過敏原,不僅能同時分析多種過敏原蛋白E(sIgE),還可以達到半定量分析之效果。僅需微量的檢體與單一步驟,即可找出引起犬隻過敏症狀的過敏原,可節省許多時間與金錢。
基本操作原理
本產品的晶片(寬一英吋、長三英吋)表面經特殊鍍層處理,其高透光度與TFT-LCD面板同級。每片晶片分隔成四個反應區,能同時分析四個檢體。利用精密點印系統,在每一反應區中點印62種過敏原(見附件1)
,用以檢測血清中是否含有與過敏原對應的特異性抗體。
在取得犬隻血清後,將血清檢體加到晶片上,經過約二小時反應與操作後,藉由標記螢光之第二抗體與免疫球蛋白E結合,再使用雷射掃描儀器掃描晶片上之螢光激發訊號。繼之,電腦將螢光訊號判讀轉換為數位訊號,再利用公式推算出各特異過敏原之免疫球蛋白E的濃度。螢光訊號依照強度等級區分為4個區間,即為微反應、輕度反應、中度反應與嚴重反應4個等級,中度反應以上則定為陽性。

圖2
基本操作原理
檢驗報告解讀
微反應(0級)基本上可視為無反應,屬於正常範圍。
其它輕度(1-2級)、中度(3-4級)、重度(5-6級)指標較具備臨床意義。
過敏反應指標(輕度、中度、重度)與臨床症狀嚴重程度不一定正相關。
對於檢測結果顯示可能引起急性過敏的食物品項,應該避免食用。
一般以級數3以上認定為可能之過敏原,部分醫師認為級數2以上就應注意。
對於檢測結果顯示可能引起急性過敏的食物品項,如果過去經驗顯示食用後2小時內,並未誘發嚴重急性過敏症狀,仍宜節制減少食用次數。即使檢測結果未顯示可能引起急性過敏的食物品項,如果過去經驗顯示食用後會誘發急性過敏症狀,亦應嚴格避免食用。
避免食入過敏原
停止食用引起過敏的食物後約半個月可恢復正常,勿提供寵物人吃的食物,如麵包、饅頭、養樂多、優酪乳中含有大量酵母菌,較易導致寵物出現過敏症狀等情況,應避免餵食。
避免接觸過敏原
若寵物是對樹木、蟑螂、塵蟎及花粉等過敏,可減少寵物外出或直接與過敏原接觸的機會,一般情況來說,急性過敏反應在停止接觸過敏原後約半個月可恢復正常。若對花粉過敏,在春天花粉充斥的季節寵物應儘量留在室內,或避開大部分花粉散布的時間(早上5點~10點間)。
檢體收集與送檢流程

與其他方法比較優點
生物晶片的靈敏度,約為傳統的ELISA分析的100倍,而與皮膚穿刺貼片測試比較,生物晶片對食物性過敏因子的檢出率較高。此外,也能免除寵物剃毛的不便和皮膚測試的風險。生物晶片技術已逐漸取代目前的檢驗方式,成為免疫檢驗的新主流。新開發的犬隻62項過敏檢測生物晶片具有下列優點:
1.可同時檢測為數眾多的過敏原(較ELISA或皮膚測試多)
2.所需檢體量少-
只需0.2 c.c的血清,可減少寵物抽血的痛苦
3.可做半定量分析-
精確的找出並分析各種特異性過敏原蛋白E
4.具有多種本地區域性特色之過敏原項目,如台灣常見行道樹之花粉
5.規格及檢測項目具擴充性及彈性
6.避免因皮膚測試造成寵物休克風險
7.測試時不需要剃除毛髮
本公司將自民國95年起迄今所收集之716支檢體,建立台灣地區犬隻過敏原資料庫,統計出犬類吸入性過敏原與食入性過敏原的十大排行榜,其結果不僅與Wills.J
於1994所發表之國際文獻結果一致,更可找出台灣地區特有之過敏項目(見附件2)。若以獸醫師之臨床診斷為標準方法與晶片之方法之結果與之比較,其正確率亦可高達85%(見附件3)。
本產品提供了臨床獸醫師及飼主在過敏相關疾病診斷上一個有利的工具。在獸醫師方面,除可檢測出引發犬隻過敏之過敏原項目,以用於減敏治療的選擇依據之外,亦可以作為減敏處方飼料的配置、功能性益生菌的提供(如:犬敏舒)之參考依據。而在飼主方面,可為後續改善飼養習慣、飲食輪替、清潔方法、環境整理等方面提供參考,以舒緩犬隻之過敏反應的臨床症狀。
附表1
62項過敏原
|
黴菌細菌類 |
花粉類 |
酵母類 |
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煙色麴菌 |
刺莧草 |
啤酒酵母 |
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青黴菌 |
早熟禾 |
麵包酵母 |
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交錯黴菌 |
尤加利樹 |
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白色念珠菌 |
狗牙根草 |
肉類 |
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芽枝黴菌 |
相思樹 |
羊肉 |
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金黃色葡萄球菌及中間鏈球菌 |
豕草 |
鴨肉 |
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皮屑芽孢菌 |
羊蹄草 |
豬肉 |
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火雞肉 |
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雞肉 |
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節肢動物類 |
五穀類 |
牛肉 |
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粉塵蹣 |
米飯 |
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屋塵蹣 |
花生 |
蔬菜類 |
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熱帶無爪蹣 |
黃豆 |
胡蘿蔔 |
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腐食酪蹣 |
小麥 |
馬鈴薯 |
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粗足粉蹣 |
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玉米 |
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德國蟑螂 |
海鮮類 |
亞麻仁 |
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白線斑蚊屬 |
鮭魚 |
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三斑家蚊屬 |
鱈魚 |
水果類 |
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跳蚤 |
鯷魚 |
西瓜 |
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壁蝨 |
沙丁魚 |
柳橙 |
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恙蟲 |
鯖魚 |
橘子 |
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蝦 |
梨 |
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蟹 |
哈密瓜 |
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毛屑類 |
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貓毛屑 |
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羊毛屑 |
奶蛋類 |
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牛毛屑 |
牛奶 |
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人毛屑 |
蛋黃 |
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鴿毛屑 |
蛋白 |
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起士 |
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附表2
犬隻吸入性過敏原前十名:
犬隻食入性過敏原前十名:
|
Blomia tropicals stoirge mite |
35% |
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Yeast brewer's |
28% |
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Tyrophagus Putrescentiae |
32% |
Corn |
27% |
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Amaranthus retroflexus |
27% |
Milk |
21% |
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Aspergillus fumigatus |
26% |
Egg white |
19% |
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Alternaria alternate |
26% |
Yeast baker's |
16% |
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Dermatophagoides pteronyssinus |
23% |
Cheese |
12% |
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Ambrosia
Artemisiifolia |
20% |
Egg yolk |
11% |
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Cynodon Dactylon |
20% |
Cod fish |
11% |
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Dermatophagoides farinae |
19% |
Lamb |
11% |
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Acarus Siro |
17% |
Wheat |
10% |
附表3
與臨床診斷結果之比較
| |
臨床診斷狀況 |
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晶片結果 |
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過敏 |
無過敏 |
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陽性 |
True Positive (TP)=559 |
False Positive (FP)=15 |
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陰性 |
False Negative (FN)=96 |
True Negative (TN)=46 |
*
Sensitivity(檢測靈敏度)=
TP/TP +FN=559/(559+96)=85%
Specificity(檢測專一性)=
TN/TN + FP =46/(46+15)=75%
Accuracy (檢測正確率)=(TP+TN)/TP+FN+FP+TN=(559+46)/716=85% |